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CoIP蛋白质谱技术
技术简介:
蛋白免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础,研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法。蛋白免疫共沉淀的设计理念是,假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员,那么利用这种蛋白的特异性抗体,就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来,进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中的其他成员。通过质谱检测已知蛋白的未知结合蛋白。云序生物具有成熟的蛋白质组学平台,提供CoIP-质谱的全套服务。
图注:云序 CoIP 实验流程
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高分文章案例
案例1:CoIP寻找已知蛋白的未知结合蛋白(CoIP-质谱)
原文:NbCSPR underlies age-dependent immune responses to bacterial cold shock protein in Nicotiana benthamiana
期刊:Proceedings of the National Academy of Sciences 影响因子:9.58
植物中,病原物相关分子模式(PAMPs)被模式识别受体(PRRs)识别后,会与LRR-RK BRI1相关激酶1(BAK1)相互作用,从而引发植物的免疫应答反应。本文作者使用BAK1作为分子诱饵来寻找细菌冷休克蛋白的csp22肽(一种PAMPs)所需的模式识别受体(PRRs),作者建立了一种方法来识别仅在csp22处理后与BAK1相互作用的蛋白质,经csp22处理后BAK1在yan草中短暂表达,用CoIP-MS方式鉴定与BAK1互作的蛋白,从而识别csp22所需的新的PRRs--NbCSPR。
图1.寻找BAK1结合的蛋白--NbCSPR
案例2:CoIP探究两种已知蛋白的互作(CoIP-Western Blot)
原文:A Novel Allosteric Inhibitor of Phosphoglycerate Mutase 1 Suppresses Growth and Metastasis of Non-Small-Cell Lung Cancer
期刊:Cell Metabolism 影响因子:22.42
PGAM1(磷酸甘油酸突变酶1) 是有氧糖酵解过程中重要的酶,参与细胞内生物大分子合成并维持氧化还原稳态,从而促进肿 瘤细胞增殖及转移。近期研究表明,非小细胞肺ai(NSCLC)患者中PGAM1表达增加且与不良预后ming显相关。本文发现一种新型PGAM1变构抑 制剂HKB99,通过CoIP实验证实HKB99能抑 制PGAM1和ACTA2的相互作用,从而抑 制非小细胞肺ai的增殖和分化过程,达到抑 制肿 瘤生长的目的。

图2. HKB99能抑 制PGAM1和ACTA2的相互作用
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云序技术优势:
一站式服务:
客户只需提供细胞或组织以及抗体,云序生物为您完成样品处理、IP实验、蛋白检测到数据分析整套服务流程。
低丰度富集:
富集检测低丰度目的蛋白-蛋白复合物
具有成熟蛋白质组学平台:
提供CoIP-质谱。 -
样本要求:
样品类型:细胞、组织,其它样品信息请详询
样品信息:目标蛋白具体信息以及物种信息
样品量:
细胞:5×10^8
组织:500mg
样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成 5-10 mg 小块),液氮冻存后,-80℃保存。
样品运输:干冰运输。
技术服务
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关于我们
云序生物是国家高新技术企业及ISO9001认证单位,以RNA修饰组、表观遗传组与时空组学为特色,依托高通量测序平台,以“技术创新+全链条服务”为核心,通过专利技术应用(如GLORI)、临床微量样本技术优化及单细胞-空间多组学整合能力,持续推动表观遗传与转录组学发展。
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