• CoIP蛋白质谱技术

     

     

     

    技术简介:

     

    蛋白免疫共沉淀(Co-ImmunoprecipitationCoIP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法。蛋白免疫共沉淀的设计理念是,假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员,那么利用这种蛋白的特异性抗体,就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来,进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中的其他成员。通过质谱检测已知蛋白的未知结合蛋白云序生物具有成熟的蛋白质组学平台,提供CoIP-质谱的全套服务。

    云序 CoIP 实验流程 

    图注:云序 CoIP 实验流程

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  • 高分文章案例

     

    案例1:CoIP寻找已知蛋白的未知结合蛋白(CoIP-质谱)

     

    原文:NbCSPR underlies age-dependent immune responses to bacterial cold shock protein in Nicotiana benthamiana

     

    期刊:Proceedings of the National Academy of Sciences                影响因子9.58       

          

    植物中,病原物相关分子模式(PAMPs)被模式识别受体(PRRs)识别后,会与LRR-RK BRI1相关激酶1(BAK1)相互作用,从而引发植物的免疫应答反应。本文作者使用BAK1作为分子诱饵来寻找细菌冷休克蛋白的csp22肽(一种PAMPs)所需的模式识别受体(PRRs),作者建立了一种方法来识别仅在csp22处理后与BAK1相互作用的蛋白质,经csp22处理后BAK1在yan草中短暂表达,用CoIP-MS方式鉴定与BAK1互作的蛋白,从而识别csp22所需的新的PRRs--NbCSPR。

    寻找BAK1结合的蛋白--NbCSPR 

    1.寻找BAK1结合的蛋白--NbCSPR

     

     

     

    案例2:CoIP探究两种已知蛋白的互作(CoIP-Western Blot)

     

    原文:A Novel Allosteric Inhibitor of Phosphoglycerate Mutase 1 Suppresses Growth and Metastasis of Non-Small-Cell Lung Cancer

     

    期刊:Cell Metabolism                  影响因子:22.42      

     

    PGAM1(磷酸甘油酸突变酶1) 是有氧糖酵解过程中重要的酶,参与细胞内生物大分子合成并维持氧化还原稳态,从而促进肿 瘤细胞增殖及转移。近期研究表明,非小细胞肺ai(NSCLC)患者中PGAM1表达增加且与不良预后ming显相关。本文发现一种新型PGAM1变构抑 制剂HKB99,通过CoIP实验证实HKB99能抑 制PGAM1和ACTA2的相互作用,从而抑 制非小细胞肺ai的增殖和分化过程,达到抑 制肿 瘤生长的目的。

                 HKB99能抑制PGAM1和ACTA2的相互作用

    2. HKB99能抑 制PGAM1ACTA2的相互作用 

  • 云序技术优势:

     

    一站式服务:

    客户只需提供细胞或组织以及抗体,云序生物为您完成样品处理、IP实验、蛋白检测到数据分析整套服务流程。

    低丰度富集:
    富集检测低丰度目的蛋白-蛋白复合物
    具有成熟蛋白质组学平台:
    提供CoIP-质谱。

     

     

  • 样本要求:

     

    样品类型:细胞、组织,其它样品信息请详询

     

    样品信息:目标蛋白具体信息以及物种信息

     

    样品量:

    细胞:5×10^8

    组织:500mg

     

    样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成 5-10 mg 小块),液氮冻存后,-80℃保存。

     

    样品运输:干冰运输。

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