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RNA修饰结合蛋白的质谱鉴定技术
技术简介:
RNA Pull-down结合质谱分析(RNA Pull-down-MS)技术是研究RNA结合蛋白的核心实验方法之一。它的核心思想是利用体外转录或化学合成的、带有特定标签的目标RNA分子作为“诱饵”,从复杂的细胞裂解液或蛋白混合物中“钓取”(Pull-down)能够特异性结合该RNA的蛋白质。随后,将这些捕获的蛋白质通过高灵敏度的质谱(Mass Spectrometry, MS)进行鉴定和定量分析。
在RNA修饰研究领域,对于像ac4C这类部分关键调控因子(如特异的eraser和reader)尚未被发现的修饰,RNA Pull-down-MS技术提供了一种强有力的解决方案:人工合成带有ac4c修饰的探针,“钓取”能够特异性结合ac4c修饰的蛋白,从而明确介导ac4c修饰的效应蛋白。
该技术的成功应用高度依赖于高质量的修饰标记RNA探针(“诱饵”)。同时,为了有效应对非特异性结合的挑战,保证结果的准确性,此类研究必须额外合成并使用严格匹配的、不带修饰的RNA探针作为阴性对照。通过比较修饰探针组与未修饰对照组的Pull-down结果,可以显著排除非特异性结合蛋白的干扰,精准鉴定出真正特异地结合目标修饰(如ac4C)的蛋白质。
云序生物依托成熟的修饰探针合成技术,独家提供带特定修饰的探针及其匹配的未修饰对照探针,实现高灵敏、高特异性的RNA Pull-Down-质谱/MS服务,为研究人员(尤其是研究新型RNA修饰及其结合蛋白的研究者)提供强有力的工具来挖掘关键RNA结合蛋白。
RNA Pull-down-MS服务流程
产品列表:
*其他RNA修饰类型产品请电询
云序服务优势:
独家修饰探针合成: 云序生物独家提供多种RNA修饰探针(m6A、m7G、m5C、O8G、ac4C、m1A等),覆盖全、特异性强、富集效率高、背景低。
真正一站式服务: 客户只需提供细胞或组织,云序生物为您完成从探针合成→RNA提取→富集→质谱分析→生信分析整套服务流程。
全流程质控体系: 从探针合成到蛋白鉴定,每一步骤均经过严格质量管控,确保数据可靠、结果可重复。
深度机制解析: 高灵敏度质谱发掘未知互作蛋白,提供完整互作图谱,解析RNA调控功能、信号通路及疾病相关机制。
应用场景
发现特定修饰RNA结合蛋白(RBP)
验证关键调控蛋白的互作关系
解析疾病相关修饰RNA的调控网络
探索表观遗传调控新通路
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云序生物是国家高新技术企业及ISO9001认证单位,以RNA修饰组、表观遗传组与时空组学为特色,依托高通量测序平台,以“技术创新+全链条服务”为核心,通过专利技术应用(如GLORI)、临床微量样本技术优化及单细胞-空间多组学整合能力,持续推动表观遗传与转录组学发展。
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